答:首先我们先研究一下电泳的原理
1. 聚丙烯酰胺凝胶电泳可用做蛋白质纯度的鉴定.聚丙烯酰胺凝胶电泳同时具有电荷效应和分子筛选效应,可以将分子大小相同而带不同数量电荷的物质分离开,并且还可以将带相同数量电荷而分子大小不同的物质分离开。其分辨率远远高于一般层析方法和电泳方法,可以检出10的9次方~10的12次方的样品,且重复性好,没有电渗作用.
2. SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳可测定蛋白质分子量。其原理是:带大量电荷的SDS结合到蛋白质分子上克服了蛋白质分子原有电荷的影响而得到恒定的荷/质比。SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳测蛋白质分子量已经比较成功,此法测定时间短,分辨率高,所需样品量极少(1~100μg),但只适用于球形或基本上呈球形的蛋白质,某些蛋白质不易与SDS结合如木瓜蛋白酶,核糖核酸酶等,此时测定结果就不准确。
电泳只能根据分子量的大小进行分离,无法区分蛋白的性质,比如IgG的分子量都是150KD,通过电泳时无法区分哪些是自身的IgG,哪些是抗体的IgG,而Protein A/G纯化出的是总的IgG蛋白,分子量都是150KD,故此通过电泳条带都是一样的,无法将杂IgG和目的抗体IgG分离出来。
所以有时用Protein A/G纯化的抗体,电泳很纯但做WB时却并不理想,这是纯化方法和纯化工艺的不当引起的。——索莱尔抗体纯化可以帮您从杂乱的腹水或抗血清中分离出您需要的目的抗体,大大提高目的抗体的含量。